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［摘要］ 目的：了解解脲脲原体(UU)感染男性生殖系统可引起不育的致病机制。方法：比较正常生育组与不育组UU感染情况，同时检测UU感染不育组和正常生育组的精浆果糖含量、一氧化氮(NO)浓度、顶体反应。结果：不育组UU感染率与正常生育组差异有显著性(P<0.01)，UU感染不育组与正常生育组相比NO浓度、顶体反应有显著差异(P<0.01)，而果糖含量变化不显著。结论：UU感染男性生殖系统导致患者精浆果糖含量偏低、NO浓度升高、顶体反应大大降低，从而影响精子的质量。有效治疗生殖系统的UU感染对治愈男性不育有重要意义。解脲脲原体(UU)是泌尿生殖道感染的常见病原体，我们通过对不育组、正常对照的精液以及尿道炎组的泌尿生殖道分泌物进行支原体检测，分析UU对男性不育的影响，同时检测UU感染的不育男性的精液果糖含量、一氧化氮(NO)浓度及顶体反应，近一步分析UU感染对男性不育的影响。
1 材料和方法
1.1 检测对象与分组 2003年6月至2004年4月本院男科、泌尿科门诊患者及正常体检者。所有病例2周内未使用过抗生素。正常生育对照组：健康生育男性17例，年龄25岁～35岁，均为妻子正在妊娠期或有不满周岁子女的男性，各项常规指标检查均符合WHO的标准。尿道炎组：男性尿道炎患者60例。不育组：已婚不育男性43例，年龄28岁～35岁,均为正常同居＞2 a，排除无精症、少精症。不育组中UU阳性为UU感染不育组；其余阴性者为非感染UU不育组。
1.2 采集标本 标本采集尿道炎患者取尿道分泌物，取材后立即置于培养液，摇匀后接种于培养基，37 ℃培养24 h后观察。正常生育对照组、不育组受检者禁欲3 d～5 d，留取精液，置于无菌瓶内，取50 μl进行UU培养，其余采用天海精子质量检测分析系统作精液常规检查，再接着用剩余的精液作果糖、NO浓度、顶体反应检测。
1.3 试剂与方法 UU培养 采用生物梅里埃公司生产的试剂盒，该试剂盒培养基中含有蛋白质、马血清、底物及酚红指示剂等成分。当UU生长时，底物分解，使pH值升高，培养基由黄变红。果糖含量测定采用3.5间苯二酚比色法测定。NO浓度测定采用南京建成生物所配制的NO试剂盒，按操作说明测定精浆中NO的浓度。顶体反应采用考马斯亮蓝染色法。顶体区染成紫蓝色为顶体反应者，无顶体反应者不着色。
1.4 统计学处理 所测数据均以±s表示，不育组与对照组间的比较采用t检验。
2 结果
2.1 不育组与尿道炎组、正常对照组UU感染的比较 见表1。
表1 不育组与尿道炎组、正常对照组UU感染的比较(略)
2.2 三组精浆中果糖含量、NO浓度及顶体反应率比较 UU感染不育者的精浆果糖含量、NO浓度及顶体反应率均有异常变化，其中果糖含量底于正常值，NO浓度则明显高于正常的检测指标，顶体反应大大低于正常发生值。经统计学处理，UU感染组与正常对照组NO浓度和顶体反应率差异均有显著性(P<0.01)，果糖含量差异无显著性。非UU感染不育组的检测与正常生育组相比差异无显著性(P>0.05)。见表2。
表2 UU感染组、非UU感染组与正常组果糖含量、NO浓度、顶体反应检测结果(略)
3 讨论
UU是1954年首次从非淋球菌尿道炎(NGU)患者的尿道分泌物中分离获得。UU是泌尿生殖道感染的常见病原体之一，不仅引起NGU，还可引起多种泌尿生殖道疾病，如前列腺炎、附睾炎、不育症等等。本实验结果显示，不育组UU感染率与正常生育组相比较差异有显著性(P≤0.01)，与尿道炎组相比较差异无显著性(P>0.05)，但不育组UU浓度≤1万CFU/ml比例高于尿道炎组，UU感染不育患者较少出现尿道炎的临床症状，就诊率低，更易导致支原体感染反复迁延，引起生殖道慢性病理生理改变。通过检测UU感染的不育患者精浆中果糖含量、NO浓度、精子顶体反应，近一步了解UU感染对男性不育的影响。果糖是精囊分泌的特征性物质，它代谢生成的ATP是提供精子鞭毛运动所消耗能量来源，能够反应精囊的生理功能。本试验中UU感染患者精浆中果糖含量偏底，导致了精子供能不足，一定程度限制其游动能力，由于UU感染组与正常组的精浆果糖含量差异不显著，考虑果糖的异常变化并非导致不育的主要原因。NO在生殖系统中有着广泛的作用，在病理状态下，各种病原因子能诱导一氧化氮合酶的大量生成，过度表达，生成大量NO，NO是一种新型调节介质和神经递质，过度释放的NO既能激发非特异性免疫反应、杀伤致病菌，同时也能生成有害代谢物损伤正常组织结构或加重炎症［1］，UU感染的不育患者精浆中NO过量释放，大大损害了精子结构，严重影响精子的正常生理功能。UU感染患者的精子的顶体反应率明显偏底，国外研究认为，UU能分泌多种磷脂酶，其中磷脂酶A1和A2分解磷脂产生溶血磷脂和脂肪酸，裂解精子膜上的酰酯键，磷脂酶C主要在胞膜上，但也有约20％在胞质中，是磷酰基分解酶，分解磷酰基，从而破坏精子膜结构，使顶体酶外流而导致顶体丧失。总之，UU感染可以导致男性不育。Cassel等人通过电镜观察发现UU吸附在精子头部的后端和中段，精子运动能力差，数量少畸形多。采用人精子金黄地鼠受孕试验，研究UU干扰受精过程，先把预孵化的精子与UU(1型～8型)接触，然后进行穿卵实验，发现UU4型对精子穿透力有较大的干扰作用，其穿透率仅6.6％［2］。从多种资料看：UU吸附于精子，使精浆果糖、NO浓度、顶体反应率改变，影响精子穿透卵细胞的能力，干扰精子与卵细胞接触和受精，UU与精子有共同抗原，通过产生自身抗体而影响受孕。感染者经四环素或强力霉素治疗后，精子活动力增强，数量增多，经随访者30％～56％不育者可生育。有效治疗生殖系统长期较重的UU感染，对治愈男性不育及恢复男性生殖功能有重大意义。
参考文献：
［1］ 张树民，郑振群.一氧化氮与男性生育力的关系［J］.国外医学计划生育分册，1998，11(4)：202205.
［2］ 曹玉璞,叶元康.支原体与支原体病.
