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伸筋草(Herba Lycopodii)属于石松科植物石松(Lycopodium japonicum Thunb) 的干燥全草。夏、秋二季茎叶茂盛时采收,除去杂质,晒干,匍匐茎呈细圆柱形,略弯曲,长可达2m,直径1~3mm,其下有黄白色细根。直立茎作二叉状分枝。叶密生茎上,螺旋状排列,皱缩弯曲,线形或针形,长3~5mm,黄绿色至淡黄棕色,无毛,先端芒状,全缘,易碎断。质柔软,断面皮部浅黄色,木部为类白色。无臭,味淡[1]。本品辛散、苦燥、温通,能袪风湿,入肝尤善通经络。治风寒湿痹,关节酸痛,屈伸不利[2]。
全草含种生物碱,香荚兰酸、阿魏酸、石松宁碱,其中石杉碱甲(Hup A)是一种可逆性乙酰胆碱酯酶的抑制剂[3] ,对重症肌无力,记忆力减退和老年性痴呆有良好疗效 ,是治疗阿耳茨海默症(AD)的一种有前景的药物 。石杉碱甲还可以降低由谷氨酸过量表达引起的神经细胞死亡,而这种活性更加体现了它作为药物治疗AD的潜在价值 氧化应激是导致AD的因素之一,Hup A能够保护神经元细胞对抗β--样蛋白产生的毒性,并提高超氧化物歧化酶(SOD)的产生。研究发现,石杉碱甲不仅能够通过提高SOD的活力而加速体内自由基的清除,而且可以减少氧自由基的损伤[5],提示石杉碱甲抗老年痴呆作用不仅与其抑制胆碱酯酶活力有关,而且与其改善氧自由基功能减少自由基损伤有关。另外,Hup A对神经细胞的保护作用有谷氨酸受体介导的参与[6]。谷氨酸盐是N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体的激动剂,NMDA受体被激动能够增加钙离子向神经元内流,而钙离子浓度过高会导致细胞死亡。Hup A可以降低谷氨酸盐对神经细胞的毒性并提高细胞存活率。对抗谷氨酸盐机制有可能为NMDA受体激动后,Hup A阻断其信号传导通道下游某处,从而防止了谷氨酸盐导致的细胞死亡。
1993年美国食品药物管理局(FDA)批准石杉碱甲片属类胆碱能剂,现已被国际上列为第二代乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂之一[7] 。随着老龄化社会的到来,老年痴呆和记忆障碍成为临床迫切需要解决的问题 ,石杉碱甲石杉碱甲具有高选择性、高效和可逆性AChE抑制剂中好的品种。Hup A对多种认知功能缺陷的动物模型均具有增强、改善的作用,对老年痴呆症的治疗已取得成功。Hup A还具有多靶点作用,对其它神经退行性疾病也可能有良好前景。因此作为新型AChE抑制剂自1985问世以来,由于其有治疗时间长、治疗指数高的特点,有广泛的临床适用性,应用前景十分广阔[8]。
随着老龄化社会的到来,老年痴呆和记忆障碍成为临床迫切需要解决的问题,石杉碱甲对任何想提高记忆和认识功能,思维敏捷的人都是有必要的[9]。
石杉生物碱的提取可分为酸水溶液提取法和有机溶剂提取法.常见的提取方法有酒石酸浸泡、盐酸渗漏、Soxhlet抽提以及乙醇回流提取等石杉碱甲的提取、分离一般采用酸溶液提取和醇溶液提取,酸提法以盐酸浸提为首选[10],有机溶剂通常以氯仿较佳。研究不同溶剂浸提的方法及辅助浸提手段获得高回收率、高纯度的产品是石杉碱甲提取研究的方向。
天然药物中提取石杉碱甲相对比较简单,经济,收率也高。通常石杉碱甲都从蛇足石杉科植物中提取,但随着蛇足石杉科植物资源接近枯竭, 国际市场上石杉碱甲价格猛升,直接导致提取成本的增加。所以,寻找一种新的植物资源来替代蛇足石杉科植物来提取石杉碱甲是十分有必要的!
本文另辟蹊径,从伸筋草中提取石杉碱甲。准备通过各单因素试验,讨论伸筋草中提取石杉碱甲的水提工艺条件,从而试图得到最佳的水提石杉碱甲的工艺条件。进而找到一种经济,高效的石杉碱甲的粗提方法。
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