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论文编号:SP050 论文字数:5960,页数:09,附任务书,开题报告,中期检查,答辩记录
粗毛栓菌木聚糖酶cDNA的RT-PCR扩增
摘要： 本实验以半纤维素作碳源培养粗毛栓菌12d，收集菌丝体，提取总RNA，做RT-PCR，扩增出两条木聚糖酶cDNA片段。
关键词: 粗毛栓菌；木聚糖酶cDNA；RT-PCR
PCR Amplification of Xylanase cDNA in Trametesec gallica
Abstract Total RNA was extracted from Trametes gallica Fr. cailtiated for 12 days in hemicellulose medium. RT-PCR was carried out at tow cDNA fragments were amplified.
Key words Trametes gallica；xylanase cDNA；RT-PCR
目 录
摘要……………………………………………………………………………………1
关键词…………………………………………………………………………………1
Abstract……………………………………………………………………………1
Key words……………………………………………………………………………1
引言………………………………………………………………………………1
1 主要仪器、试剂与材料…………………………………………………………2
1.1 主要仪器、试剂 ………………………………………………………………2
1.2 材料 …………………………………………………………………………2
2 方法…………………………………………………………………………………3
2.1 菌种的培养………………………………………………………………………3
2.1.1 培养基的配置…………………………………………………………………3
2.1.2 菌种的接种……………………………………………………………………3
2.2 RNA的提取………………………………………………………………………3
2.2.1 实验前的准备…………………………………………………………………4
2.2.2 提取RNA………………………………………………………………………4
2.3 总RNA的纯度与浓度的测定……………………………………………………4
2.4 总RNA的甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测………………………………………4
2.5 RT-PCR………………………………………………………………………5
2.5.1 RT-PCR过程…………………………………………………………………5
2.5.2 PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳……………………………………………5
3 结果与分析……………………………………………………………………… 5
3.1 总RNA电泳结果…………………………………………………………………5
3.2 总RNA纯度与浓度的检测结果………………………………………………6
3.3 木聚糖酶cDNA的PCR扩增结果…………………………………………………6
4 讨论……………………………………………………………………………… 7
4.1 总RNA电泳结果…………………………………………………………………7
4.2 PCR扩增结果…………………………………………………………………7
4.3 试验中注意事项…………………………………………………………………7
5 结束语…………………………………………………………………………… 7
参考文献………………………………………………………………………………7
致谢……………………………………………………………………………………8
