植物细胞的实验教课成效

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实验步骤

①配制固定离析液。把盐酸的原液稀释三倍(盐酸和蒸馏水的体积比为1∶2)。取其等量的盐酸和同体积的95%的酒精混合，配成盐酸-酒精固定离析液。此液能迅速杀死细胞并保持细胞近生活状态，又能溶解胞间层，使细胞间的果胶质分解，细胞壁软化或部分分解，有利于细胞的分散和游离，有利于染色体分散，提高单个细胞的观察效果。

②水培的洋葱根尖没有根毛，最前端是约1mm透明的根冠，根冠上方乳白色部分为分生区，用刀片将根尖3mm左右剪下，立即投入固定离析液中，固定解离10～20min，待根尖酥软即可。

③用镊子从固定离析液中取出根尖，投入盛有清水的培养皿中漂洗10～20min。漂洗的效果直接影响染色，若离析液未洗净，染色时材料不易着色。

④用镊子将漂洗好的根尖放在载玻片上，滴一滴石炭酸品红染液，用刀片将根尖切碎，15min后，材料染成红色。⑤将载玻片上的染液吸去，滴上一滴清水，盖上盖玻片，用指甲肚轻轻敲打，使根尖成薄雾状，这样可以使细胞均匀地分散开来，有利于观察有丝分裂的不同时期。

⑥观察。把制好的压片置于显微镜下，在低倍镜下观察细胞分散状况，再在高倍镜下镜检分裂相的特征。显微镜下，细胞核和染色体呈鲜红的玫瑰红色，胞质为淡蓝色或无色，染色效果好。

在分生区内，平均每个视野(10×40)中少则能见到3～4个分裂相，多则可见十几个分裂相;在较好的标本上，1个视野中就能找全4个期的典型分裂相。如观察到的染色体分裂相多、染色体清晰可见的压片可照相，可将照片制作成永久片长期保存(如图1)。 4讨论与分析一定浓度的盐酸可以使植物分生组织细胞间的果胶质分解，有利于细胞的分散和游离。如果离析时间较短，则细胞间果胶质不能或很少分解，细胞之间相互重叠或连接，观察效果差;如果离析时间过长，则影响细胞的结构及细胞内大分子物质的原始形态，不能正确反映细胞的生活状态。

实践中发现，固定离析13～15min效果好。取根尖是以3mm为宜。取长了会把伸长区的细胞取上，视野中不好找到分裂相，影响实验效果。漂洗要充分，一个培养皿中不要漂洗过多数量根尖，2～3个即可，漂洗不干净影响染色。染色的时间要超过15min，以便充分染色。

石炭酸品红染液的特点是只染细胞核和染色体，背景不上色。

通过以上的实验设计，取得了前所未有的实验效果。观察植物细胞有丝分裂是《植物学》及《植物学生物学》中一个重要的基础实验。对本实验的过程、关键步骤、原理以及技巧的掌握，有助于激发学生的实验兴趣，提高认识水平，为以后的实验打下坚实的基础。

作者：张秀玲 单位：山东德州学院生物系