原位肝移植中移植肝早期功能的评价
说明：
【摘要】 目的 通过测定原位肝移植中一些血清学指标来评价肝移植术后早期移植肝的功能状况。方法 随机选取瑞金医院肝移植中心原位肝移植患者20例。分别在麻醉开始后（S）、无肝期开始即刻（A1）、无肝期结束前即刻（A2）、门静脉血流开放即刻（R0）、门静脉血流开放60min（R1）、门静脉血流开放3h（R3）、门静脉血流开放6h（R6）、门静脉血流开放12h（R12）、门静脉血流开放24h（R24）时间点抽取外周血，测定血清ALT、AST、LDH、GMP-140、vWF和HA。结果 ALT、LDH在再灌注后即刻（R0）、AST在R6即达到峰值（P<0.05），以后逐渐下降，但仍维持较高水平。LDH与ALT呈高度正相关（R＝0.948，P<0.001），LDH与AST呈中度正相关（R＝0.646，P<0.001）。GMP-140再灌注后开始升高，R3、R6、R12点达到峰值（P<0.001），以后逐渐下降，但仍维持高水平。血管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF）在再灌注后R6、R12、R24点高于正常。HA在再灌注后均高于正常。结论 AST和ALT仍然是原位肝移植术后早期反映移植肝功能状况的可靠指标；LDH与ALT及AST存在良好相关性；GMP-140、vWF和HA的升高反映了肝窦内皮细胞（SEC)的损伤程度，但能否准确反映早期移植肝功能状况则有待进一步证实。
【关键词】 原位肝移植；缺血－再灌注损伤
Early assessment of graft function in orthotopic liver transplantation
【Abstract】 Objective The aim of this study is to estimate the status of hepatic graft by measurement the levels of some serum index in orthotopic liver transplantation.Methods 20 recipients receiving orthotopic liver transplantation has been selected randomly in the transplantation center of Ruijin Hospital.The levels of serum ALT，AST，LDH，GMP-140，vWF and HA were determined at the following time points:the start of the operation (S)，the commencement of anhepatic phase (A1)，the end of anhepatic phase (A2)，instant (R0)，60 minutes (R1)，3 hours (R3)，6 hours (R6)，12 hours (R12) and 24 hours (R24) after reperfusion of portal vein.Results The level of ALT and LDH arrived the peak value at the time point of R0.The level of AST arrived the peak value at the time point of R6，and the level of LDH was correlated notably with the level of ALT and AST.The level of GMP-140 reached the peak value at the time point of R3，R6 and R12 (P<0.001) and higher than normal level.The level of vWF was higher than normal at the time point of R6，R12 and R24.The level of HA was higher than normal at every time point after reperfusion.Conclusion The levels of AST and ALT are still reliable parameters for the assessment of initial hepatic graft function;the level of LDH has good correlation with the levels of ALT and AST;the elevation of the levels of GMP-140，vWF and HA reflects the damage of sino-endothelial cell (SEC)，but whether they could reflect initial graft function or not is still need to be certified.
【Key words】 orthotopic liver transplantation;ischemia and reperfusion injury
原位肝移植术后早期确定移植肝功能的状态非常重要。肝脏的冷保存-再灌注损伤是造成移植肝早期肝功能不良的重要因素。本研究通过检测20例原位肝移植手术前后一些血清学指标来评价肝移植术后早期移植肝的功能状况。
1 资料与方法
1.1 一般资料 随机选取瑞金医院肝移植中心在2003年9月～2004年4月所施行的原位肝移植患者共20例。其中男18例、女2例，年龄35～65岁，平均（50.05±7.65）岁。受体原发病：乙肝后肝硬化10例（50%），乙肝后肝硬化伴肝癌7例（35%），急性重症肝炎2例（10%），多囊肝1例（5%）。术前受体肝功能按Child-Pugh分级评定：A级4例（20%），B级1例（5%），C级15例（75%）。
所有供体肝脏的获取均采用4℃UW液经腹主动脉、门静脉双灌注，肝脏取下后4℃ UW液保存，冷缺血末期常规做肝脏快速冰冻切片病理检查。供肝脂肪变性按下列标准分级［1］：无大泡型脂肪变性、轻度大泡型脂肪变性（<30%）、中度大泡型脂肪变性（30%～60%）、重度大泡型脂肪变性（>60%）。原位肝移植手术方式采用经典原位肝移植或背驮式原位肝移植，术中均不采用体外静脉-静脉转流。复温缺血时间（rewarm ischemic time，RWIT）为门静脉阻断、供肝置入体内至门静脉开放时间。
原位肝移植后采用的免疫抑制方案采用激素加FK506二联用药。
1.2 标本采集时间 肝移植期间在下列时间点抽取外周血液标本：S：麻醉开始后；A1：无肝期开始即刻；A2：无肝期结束前即刻；R0：门静脉血流开放即刻；R1：门静脉血流开放60min；R3：门静脉血流开放3h；R6：门静脉血流开放6h；R12：门静脉血流开放12h；R24：门静脉血流开放24h。
1.3 方法 每个时间点各抽取外周血5ml于普管，在30min内进行低温离心（BECKMAN AllegraTM 6R Centrifuge），4℃、3000转/min、10~15min，取上清液于－80℃保存。酶标仪U Quant（BIO-TEK INSTRUMENT，Inc）及配套软件KCjunior V1.31.5（BIO-TEK Autoreader Control）测定ALT、AST和LDH。IL-6：ELISA，采用酶联免疫吸附双抗体夹心法原理定量测定（由BioSource公司提供）。GMP-140：ELISA，采用酶联免疫吸附双抗体夹心法原理定量测定（由上海太阳生物技术公司提供）。vWF：ELISA，采用酶联免疫吸附双抗体夹心法原理定量测定（由上海太阳生物技术公司提供）。HA：竞争ELISA定量检测（由上海海研医学生物技术有限公司提供）。
1.4 统计学方法 数据以均数±标准差（x±s）表示。临床资料中计量资料的比较采用t检验，表示为（x±s）；计数资料的统计方法采用Fisher确切概率法，用Num（%）表示；对于实验结果各指标每个时间点之间变化差异采用两因素方差分析，组间比较采用Bonferroni法。对于各实验结果两组间各时间点均值比较采用团体t检验。两指标之间相关性分析采用Pearson相关分析。P值小于0.05为差异有显著性。统计软件采用SPSS 12.0（SPSS Inc.）软件进行数据分析。
2 结果
2.1 临床结果 20例原位肝移植中背驮式13例（65%），经典式7例（35%）。供体心脏停搏时间（non-heart-beating time，NHBT）平均（1.95±1.32）min，冷却血时间（cold ischemic time，CIT）平均（11.07±1.94）h，RWIT平均（45.95±8.65）min。
供肝冷保存末期、移植前肝活检病理显示4例有轻度大泡型脂肪变性。
1 资料与方法
2 结果
3 讨论
参考文献：
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