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论文编号:SP001 字数:13330,页数:40
摘 要
为研究腐竹生产过程中豆浆游离氨基酸含量的变化情况,本文建立一种测定豆浆中游离氨基酸的反相高效液相色谱法。优化条件为:Zorbax eclipse XDB-C18反相柱(150mm×4.6mm, 5μm);流动相:甲醇和0.05mol/L醋酸钠的体积比线性梯度(T,B%)=0,0%;20,20%;50,90%,流速:1.0mL/min ,检测波长:338nm。在此条件下得到18种游离氨基酸的直线回归方程,相关系数都在0.9900以上。豆浆中游离氨基酸含量在0-29.67mg/100mL 之间 ,豆浆煮制过程中大多数游离氨基酸含量逐步增加。回收率在80%-120%之间。
关键词 高效液相色谱法 豆浆 游离氨基酸 柱前衍生 邻苯二甲醛
目 录
1 前言............................................................. ...........1
1.1 大豆的简述 ............................................................... 1
1.1.1 大豆的来源 ............................................................. 1
1.1.2 大豆的营养价值...........................................................1
1.1.3 大豆的健功效 ............................................................2
1.2 豆浆简述 ............................................................. ....3
1.2.1 豆浆来源 ............................................................... 3
1.2.2 豆浆的营养价值 ..........................................................3
1.2.3 豆浆的保健功效 ..........................................................3
1.3 本论文研究的方法与意义.....................................................4
2 材料与方法...................................................................5
2.1 材料.......................................................................5
2.1.1 样品与试剂...............................................................5
2.1.1.1 样品...................................................................5
2.1.1.2 试剂...................................................................5
2.2 仪器 ......................................................................5
2.3 方法.......................................................................6
2.3.1 试剂的配制............................................................. 6
2.3.1.1 流动相的配制...........................................................6
2.3.1.2 衍生化试剂的配制.......................................................6
2.3.2 标准液的配制 ............................................................6
2.3.2.1 标准氨基酸溶液的配制...................................................6
2.3.2.2 混合标准氨基酸溶液的配制...............................................6
2.4 样品制备...................................................................7
2.4.1 豆浆煮制工艺.............................................................7
2.4.2 工艺要点 ................................................................7
2.4.3 样品处理 ................................................................7
2.5 色谱条件 ................................................................. 8
2.6 操作方法............................................................. .... 8
3 结果与分析 ............................................................. ....8
3.1 分离条件的摸索.............................................................8
3.1.1. 不同流动相的选择........................................................8
3.1.1.1 手动进样............................................................. 8
3.1.1.2 自动进样............................................................. 9
3.1.1.3 不同混合次数的选择 ...................................................11
3.1.1.4 确定比例 .............................................................12
3.2 标准定性 ................................................................ 13
3.2.1 18种混合标准氨基酸色谱图................................................13
3.2.2 单标保留时间与色谱图....................................................13
3.3 定量实验..................................................................17
3.3.1 标准曲线的绘制与回归方程 ...............................................17
3.3.2 标准曲线与回归方程 .................................................... 17
3.3.2.1 18种氨基酸标准曲线....................................................17
3.3.2.2 18种氨基酸回归方程 ...................................................20
3.4 样品处理与测定 ...........................................................20
3.4.1 样品处理的条件选择......................................................20
3.4.2 样品测定................................................................21
3.5 回收率试验 ...............................................................25
3.6 精密度....................................................................26
3.6.1 标准精密度............................................................. 26
3.6.2 样品精密度 .............................................................27
3.6.3 回收率精密度............................................................28
3.7 稳定性 ...................................................................29
3.7.1 标准稳定性 .............................................................29
3.7.2 样品的稳定性试验........................................................30
3.8 样品氨基酸态氮含量 .......................................................31
4 结论与讨论..................................................................32
4.1 结论 .................................................................... 32
4.2 讨论......................................................................32
参 考文献 ..................................................................33
英文摘要 ............................................................. .......34
致 谢......................................................................35