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论文编号:SP056 论文字数:5949,页数:08,附任务书,开题报告,中期检查,答辩记录
粗毛栓菌漆酶cDNA的PCR扩增
摘要 本实验以粗毛栓菌作为出发菌，进行了漆酶cDNA的PCR扩增。以半纤维素为碳源，用高碳低氮培养基, 培养10d，收集菌丝体，提取总RNA，做RT-PCR。结果显示通过RT-PCR有两条cDNA片段被扩增出来。
关键词 粗毛栓菌，漆酶cDNA，RT-PCR扩增
PCR Amplification of Laccase cDNA in Trametesec gallica
Abstract Total RNA was extracted from Trametes gallica cultivated for 10 days in high C -low N medium. The result showed that two cDNA fragments was amplified by RT-PCR.
Key words Trametes gallica Fr., laccase cDNA, RT-PCR
目 录
摘要……………………………………………………………………………………………1
关键词…………………………………………………………………………………………1
Abstract………………………………………………………………………………………1
Key words…………………………………………………………………………………1
引言……………………………………………………………………………………………1
1 材料与方法………………………………………………………………………………2
1.1 主要仪器与试剂用品 …………………………………………………………………2
1.1.1主要仪器……………………………………………………………2
1.1.2主要试剂……………………………………………………………2
1.1.3主要用品……………………………………………………………2
1.2 菌株及培养方式………………………………………………………………………2
1.2.1菌株………………………………………………………………2
1.2.2培养基………………………………………………………………3
1.3 PCR引物………………………………………………………………………………3
1.4 总RNA的提取与检测…………………………………………………………………3
1.4.1 总RNA的提取………………………………………………………………………3
1.4.2 总RNA的甲醛变性琼脂糖凝胶电泳………………………………………………4
1.4.3 总RNA纯度与浓度的检测…………………………………………………………4
1.5 RT-PCR…………………………………………………………………………4
1.5.1 逆转录………………………………………………………………………………4
1.5.2 总 cDNA的PCR扩增……………………………………………………………4
1.5.3 PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳…………………………………………………5
2 结果与讨论……………………………………………………………………………… 5
2.1 总RNA电泳结果………………………………………………………………………5
2.2 总RNA纯度与浓度……………………………………………………………………5
2.3 PCR扩增结果……………………………………………………………………………6
参考文献………………………………………………………………………………………6
致谢……………………………………………………………………………………………7
