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灵芝与中药共发酵产物的药理学初步研究
摘要:为考察灵芝培养基在添加不同中药后,其发酵液药理作用的变化,选择小鼠负重游泳实验,戊巴比妥钠睡眠时间试验,小鼠断头后致急性脑缺氧试验,以及对S180荷瘤小鼠瘤重的影响,研究在灵芝培养基中添加不同中药后其发酵液的抗疲劳、改善睡眠、耐缺氧与抑制肿瘤作用,并研究了这几味中药对灵芝生长的影响.结果发现在灵芝培养基中添加黄芪、姜黄、补骨脂、红毛五加后,其发酵液能明显延长小鼠负重游泳时间;在培养基中添加黄芪、红毛五加的发酵液对小鼠急性脑缺血性缺氧具有较好的保护作用;在培养基中添加巴戟天后,其发酵液灌胃的小鼠,瘤重减轻.表明在灵芝培养基中添加中药后,会改变灵芝发酵液的药理作用.
关键词:灵芝;微生物转化;抗疲劳;耐缺氧;改善睡眠;抗肿瘤引言灵芝(Ganoderma lucidum)为多孔菌科灵芝属真菌,在我国已有2000多年的药用历史,始载于《神农本草经》,具有补中益气、滋补强壮、扶正固本、延年益寿等功效.现代研究发现灵芝对运动性疲劳具有抵抗作用[1],可以治疗神经衰弱引起的失眠[2],能改善微循环提高动物耐缺氧的能力[3]. 在灵芝培养基添加中药后发酵的过程与生物量的变化已经有所研究[4],但是对其共发酵液的药理作用少有报道.目前,已有报道表明香菇与中药渣的共发酵物能提高小鼠免疫能力[5].对此,选择了川产道地药材黄芪、姜黄、补骨脂、巴戟天、淫羊霍、红毛五加,将其添加到灵芝培养基中,研究添加中药后灵芝发酵液在抗疲劳、耐缺氧等方面药理作用的变化.
样 品 灵芝(赤芝,Ganoderma lu- cidum)由四川省农业科学院土壤肥料研究所微生物实验室提供. 黄芪、姜黄、补骨脂、巴戟天、淫羊霍、红毛五加购自成都同仁堂.将中药加水浸泡2 h后,用微火煮开20 min,取药液,反复熬取3遍,合并三次药液,浓缩至1 g/mL(即1 g中药水煎液浓缩至1 mL). 斜面培养基:PDA综合斜面培养基. 液体种子培养基:PDA综合斜面培养基. 样品培养基:麦麸1.5%,蔗糖2%,蛋白胨 0·2%,酵母膏0·1%, KH2PO40·1%, MgSO4 0·5%,pH自然.
发酵样品制备 在样品培养基中分别添加中药水煎浓缩液,姜黄、补骨脂、巴戟天、淫羊霍、红毛五加浓度为0·36%,黄芪为1·2%,灵芝空白培养基为未添加中药的样品培养基.121℃,灭菌30 min. 将保存菌种斜面活化(28℃,7 d),接入液体种培养基中(27℃,180 r/min,7 d),液体种子按接种量10%接入加药后的样品培养基中(27℃,180 r/min,5 d),收集所有发酵产物,匀浆,60℃减压浓缩2.5倍.
