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一氧化氮及其合酶在杀伤肿瘤细胞中的作用

来源:http://myeducs.cn 联系QQ:点击这里给我发消息 作者: admin 发布时间: 13/09/05
【网学提醒】:本文主要为网上学习者提供一氧化氮及其合酶在杀伤肿瘤细胞中的作用,希望对需要一氧化氮及其合酶在杀伤肿瘤细胞中的作用网友有所帮助,学习一下吧!

资料包括: 论文(3页2122字) 
说明:
关键词: 巨噬细胞,肺泡,一氧化氮合酶,肿瘤

  活化的巨噬细胞(M)在抗肿瘤过程中具有十分重要的意义。一氧化氮(NO)作为活化的M的细胞毒效应分子之一,在杀伤肿瘤效应中起重要作用[1]。本研究通过测定肺M内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及其产物NO水平,并应用特异性NOS抑制剂来观察肺M对肿瘤细胞杀伤作用的影响,旨在探讨肺M NOS活性与肿瘤杀伤力之间的关系,以阐明肺M在抗肿瘤免疫中的地位。
1 材料和方法
1.1 肺M的制备及培养 体质量20~25 g的纯种C57雄性小鼠32只,购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司,随机分成实验组和对照组,每组16只,均经腹腔注入2%戊巴比妥钠麻醉,腹主动脉放血处死,暴露颈部气管后,用37℃生理盐水进行支气管肺泡灌洗,每次1 ml,共15次。将回收的灌洗液以1 500 r/min离心10 min,弃上清,用含10%小牛血清的最低必需培养液(MEM)配成 1×106个/ml的细胞悬液。将细胞悬液接种于96孔板中,37℃,5% CO2培养2 h,洗去未贴壁细胞,根据需要分别加入不同剂量(50,100,150,200 U/ml)的干扰素γ(INFγ),继续培养24 h。
1.2 肿瘤细胞培养上清液的收集 将无菌取得的肥大细胞肿瘤细胞 P815 (上海肿瘤研究所提供)以 5×105个/ml的密度培养在RPMI 1640培养液中,置37℃,5% CO2培养箱培养48 h, 2 500 r/min离心20 min,取上清液,置-20℃保存待用。
目录:
  1 材料和方法

  2 结果

  3 讨论


参考文献:
1 Cui S, Reichner JS, Mateo RB, et al. Activated murine macrophages induce apoptosis in tumor cells through nitric oxide- dependent or -independent mechanisms[J]. Cancer Res,1994,54 (9):2462
  2 Smith SD, Wheeler MA, Weiss RM. Nitric oxide synthase: an endogenous source of elevated nitrite in infected urine[J]. Kidney Int, 1994,45(2):586
  3 Wang W, Keller K, Chadee K. Entamoeba histolytica modulates the nitric oxide synthase gene and nitric oxide production by macrophages for cytotoxicity against amoebae and tumour cells[J]. Immunology, 1994,83(4):601
  4 Langrehr JM, Hoffman RA, Lancaster JR,et al. Nitric oxide ——a new endogenous immunomodulator[J]. Transplantation,1993, 55(6):1205
  5 Sanchez-Bueno A, Verkhusha V, Tanaka Y, et al. Interferon-γ-dependent expression of inducible nitric oxide synthase, interleukin-12, and interferon -γ- inducing factor in macrophages elicited by allografted tumor cells[J]. Biochem Biophys Res Commun, 1996,224(2):555
  6 Stuehr DJ, Marletta MA. Mammalian nitrate biosynthesis: mouse macrophages produce nitrite and nitrate in response to Escherichia coli lipopolysaccharide[J]. Proc Natl Acad Sci USA,1985,82(22):7738
  7 Hibbs JB Jr, Taintor RR, Vavrin Z. Macrophage cytotoxicity: role for L-arginine deiminase and iminonitrogen oxidation to nitrite[J]. Science,1987,235(4787):473
  8 Sarih M, Souvannavong V, Adam A. Nitric oxide synthase induces macrophage death by apoptosis[J]. Biochem Biophys Res Commun, 1993,191(2):503
  9 Shimaoka M, Iida T,Ohara A, et al. NOC,a nitric-oxide-releasing compound, induces dose dependent apoptosis in macrophages[J]. Biochem Biophys Res Commun,1995,209(2):519

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