【网学提醒】:本文主要为网上学习者提供链置换扩增术(SDA)及其进展,希望对需要链置换扩增术(SDA)及其进展网友有所帮助,学习一下吧!
资料包括: 论文(4页3539字)
说明:
关键词: 链置换扩增术;DNA检测
摘要 链置换扩增术(strand displacement amplification,SDA)是近几年发展起来的一种酶促DNA体外等温扩增方法。在靶DNA两端带上被化学修饰的限制性核酸内切酶识别序列,核酸内切酶在其识别位点将链DNA打开缺口,DNA聚合酶继之延伸缺口3’端并替换下一条DNA链。被替换下来的DNA单链可与引物结合并被DNA聚合酶延伸成双链。该过程不断反复进行,使靶序列被高效扩增。本文主要介绍SDA的原理及其发展。
关键词 链置换扩增术,DNA检测
近几年来,随着分子生物学技术的迅速发展,基于核酸(DNA或RNA)检测的诊断方法(如各种PCR、Southern杂交和Northern 杂交)已大量建立并获得广泛应用。这给临床诊断提供了快速、灵敏和准确的方法。虽然这些方法在临床实践中也遇到一些问题,如PCR的假阳性与假阴性问题,但基因诊断具有一些特殊优点,如:需样量少、快速灵敏和准确、应用范围广泛;因此,众多学者学者不断改进现有技术探索新方法。新技术如转录依赖的扩增系统(TAS)、自主序列复制(3SR)、循环探针反应、Qβ复制酶扩增法、快速导流杂交法、DNA凝集反应等陆续出现。SDA就是在这样的背景下产生发展起来的,与其它的DNA扩增技术相比,SDA有快速、高效、特异的优点且无需专用设备。
1992年,美国Becton Dickinson研究中心的Walker等发表了关于SDA的研究报道,标志一种新的DNA扩增技术SDA的诞生。人们也在不断对SDA进行改良。用BsoBⅠ代替HincⅡ和采用exo-Bca酶代替exo-Klenow酶建立了嗜热SDA(thermophilic sDA),并以荧光偏振(Fluorescence Polarization,FP)检测技术代替电泳法作为SDA产物检测方法,使SDA检测更快速、灵敏且可定量。
目录:
1 SDA的原理
2 DNA的研究进展
3 SDA的不足
4 SDA的应用前景
参考文献:
1 Walker GT,Fraiser MS,Schram JL,et al.Nucleic Acids res,1992;20(7):1691-6
2 Walker GT,Nadeau JG,Spears PA,et al.Nucleic Acids res,1994;22(13):2670-7
3 Walker GT,Nadeau JG,Linn CP,et al.Clin Chem,1996;42(1):9-13
4 Walker GT,Nadeau JG amd Linn CP.Mol cell-Probes,1995;9(6)399-403
5 Walter NG.J Mol Biol,1995;254(5):856-68
6 Little MC,Sears PA and Shank DD.Mol Cell probes,1994;8(5)375-84
7 Zwadyk P Jr,Down JA,Myers N,et al.J Clin microbiol,1994;32(9)2140-6
8 Walker GT,Linn CP and Nadeau JG.Nucleic Acids res,1996;24(2)348-53
9 Walkdr GT and Linn CP.Clin Chem,1996;42(10):1604-8
10 Spears PA,Linn CP,Woodard DL,et al.Anal biochem,1997;247(1):130-7
11 Spargo CA,Fraiser MS,Van Cleve M,et al.Mol Cell probes,1996;10(4):247-56
12 Down JA,O’Connell MA,Dey MS,et al.J Clin microbiol,1996;34(4)860-5
13 Ichiyama S,Ito Y,Sugiura F,et al.J Clin microbiol,1997;35(12):3082-5
14 Mehrpouyan M,Bishop JE,Ostrerova N,et al.Mol Cell probes,1997;11(5):337-47